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如何區(qū)別激發(fā)光光譜儀和熒光光譜儀?

點(diǎn)擊次數(shù):3125 更新時(shí)間:2019-03-26

   熒光光譜儀是一種定性、定量分析的儀器。通過(guò)熒光光譜儀的檢測(cè),可以獲得物質(zhì)的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率、熒光強(qiáng)度、熒光壽命、斯托克斯位移、熒光偏振與去偏振特性,以及熒光的淬滅方面的信息。是研究藥物與蛋白質(zhì)相互作用的常用儀器。藥物與蛋白質(zhì)相互作用后可能引起藥物自身熒光光譜和蛋白質(zhì)自身熒光(內(nèi)源熒光)光譜以及同步熒光光譜的變化,如熒光強(qiáng)度和偏振度的改變、新熒光峰的出現(xiàn)等,這些均可以提供藥物與蛋白質(zhì)結(jié)合的信息。

 
  如何區(qū)別激發(fā)光光譜儀和熒光光譜儀?熒光往往很弱,如果不把它從激發(fā)光里分離出來(lái),它會(huì)被激發(fā)光淹沒(méi)。熒光測(cè)量系統(tǒng),通常用以下一種或幾種方法來(lái)分離熒光:
 
  1、90°布置法:激發(fā)光和探測(cè)器90°方向布置。由于熒光沒(méi)有方向性,它向四周發(fā)射,因此可以把探測(cè)器放在與激發(fā)光成90°的位置來(lái)接收熒光。大部分的熒光測(cè)量裝置都采用此方法(同時(shí)常常配上其它方法)。
 
  2、時(shí)間延遲法:由產(chǎn)生熒光的原理可知,熒光從產(chǎn)生到消失,它有一個(gè)時(shí)間過(guò)程(即從高能級(jí)的非穩(wěn)態(tài)躍遷到低能級(jí)的亞穩(wěn)態(tài)或穩(wěn)態(tài)的時(shí)間)。不同的物質(zhì),這個(gè)時(shí)間的長(zhǎng)短是不一樣的,它們從幾微秒到幾分鐘不等。我們可以給探測(cè)器的快門一個(gè)延遲時(shí)間,讓激發(fā)光消失后開始對(duì)熒光采樣。在一些特殊條件,如用反射探針測(cè)固體、液體的熒光時(shí),光路無(wú)法90°布置,這時(shí)需要通過(guò)延遲采樣時(shí)間來(lái)分離出熒光。
 
  3、濾波法:從熒光光譜儀產(chǎn)生原理可知,熒光的波長(zhǎng)大于激發(fā)光的波長(zhǎng)。我們?cè)谔綔y(cè)器前面放一個(gè)長(zhǎng)通濾波片,它的截至波長(zhǎng)稍大于激發(fā)光波長(zhǎng)。這樣,只有熒光才能被探測(cè)器采集。該法的另一個(gè)好處是可以慮掉一部分雜散光,但是它也可能慮掉一部分熒光。

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